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菌種的培養(yǎng)條件以及保存方法介紹

作者:樂診生物技術(shù)發(fā)布時間:2020-08-05 08:27:45瀏覽量:0
  菌種的存活條件比較特殊,在培養(yǎng)菌種的時候需要按照一定的要求進(jìn)行培養(yǎng),保證菌種有一個正常的存活條件。同時也要對菌種進(jìn)行合理的保存。那么你知道菌種的培養(yǎng)條件以及保存方法介有哪些嗎?下面小編為大家介紹一下,一起來看看吧,看完你就明白了。

  菌種的培養(yǎng)條件有哪些?

 
  1、培養(yǎng)條件和菌齡實踐證明,采用更適培養(yǎng)基和更適保藏溫度進(jìn)行保藏,可提高微生物的存活率,延長菌種保藏期。
 
  研究表明,處于穩(wěn)定期的細(xì)胞或成熟的孢子對不良環(huán)境具有較強的抗性,因而,保藏非芽胞細(xì)菌和酵母菌,應(yīng)采用對數(shù)末期或穩(wěn)定初期的細(xì)胞。
 
  2、菌種懸液的濃度為了保證菌種保藏期間具有一定的存活細(xì)胞,往往將保藏微生物的細(xì)胞濃度增大。
 
  一般要求細(xì)菌細(xì)胞和放線菌孢子的濃度108/ml,酵母菌細(xì)胞和霉菌孢子的濃度>107/ml.
 
  3、保護劑采用液氮超低溫冷凍、真空干燥和真空冷凍干燥保藏菌種,保護劑的選擇是提高微生物冷凍或干燥存活率,延長菌種保藏期的關(guān)鍵因素。
 
  保護劑分為低分子保護劑(低聚糖類、醇類、緩沖鹽類、氨基酸和維生素類)和大分子保護劑(蛋白質(zhì)和多肽類、多糖類)。
 
  4、凍結(jié)速度在液氮法和凍干法保藏菌種的過程中,凍結(jié)速度是影響微生物存活率的重要因素。
 
  研究表明,真核微生物菌種適宜慢速凍結(jié),而原核微生物菌種經(jīng)慢速凍結(jié)和快速凍結(jié)后,細(xì)胞存活率差異不顯著。
 
  5、保藏條件根據(jù)菌種保藏的目的和原理,盡量采取低溫、干燥、避光和真空密封等綜合技術(shù)措施和條件保藏菌種,以利于菌種保藏期的延長。
 
  6、恢復(fù)培養(yǎng)處于液氮冷凍狀態(tài)的菌種恢復(fù)培養(yǎng)時,通常采用38℃--40℃快速升溫解凍,因為慢速升溫解凍有可能出現(xiàn)胞內(nèi)再結(jié)冰,造成胞內(nèi)冰晶增大而傷害細(xì)胞。

  菌種保存的方法有哪些?

 
  1、斜面低溫保藏法
 
  將菌種接種在適宜的斜面培養(yǎng)基上,待菌種生長完全后,置于4℃左右的冰箱中保藏,每隔一定時間(保藏期)再轉(zhuǎn)接至新的斜面培養(yǎng)基上,生長后繼續(xù)保藏,如此連續(xù)不斷。
 
  此法廣泛適用于細(xì)菌、放線菌、酵母菌和霉菌等大多數(shù)微生物菌種的短期保藏及不宜用冷凍干燥保藏的菌種。
 
  2、石蠟油封藏法
 
  此法是在無菌條件下,將滅過菌并已蒸發(fā)掉水分的液體石蠟倒入培養(yǎng)成熟的菌種斜面(或半固體穿刺培養(yǎng)物)上,石蠟油層高出斜面頂端lcm,使培養(yǎng)物與空氣隔絕。
 
  加膠塞并用固體石蠟封口后,垂直放在室溫或4℃冰箱內(nèi)保藏。使用的液體石蠟要求優(yōu)質(zhì)無毒,化學(xué)純規(guī)格,其滅菌條件是:150~170℃烘箱內(nèi)滅菌lh.
 
  3、砂土管保藏法
 
  這是一種常用的長期保藏菌種的方法,適用于產(chǎn)孢子的放線菌、霉菌及形成芽孢的細(xì)菌,對于一些對干燥敏感的細(xì)菌如奈氏球菌、弧菌和假單胞桿菌及酵母則不適用。
 
  其制作方法是,先將砂與土分別洗凈、烘干、過篩,按砂與土的比例為(1~2):1混勻,分裝于小試管中,砂土的高度約1cm,以121℃蒸汽滅菌1~1.5h,間歇滅菌3次。
 
  4、麩皮保藏法
 
  麩皮保藏法亦稱曲法保藏。即以麩皮作載體,吸附接入的孢子,然后在低溫干燥條件下保存。
 
  其制作方法是按照不同菌種對水分要求的不同將麩皮與水以一定的比例1:(0.8~1.5)拌勻,裝量為試管體積2/5,濕熱滅菌后經(jīng)冷卻,接入新鮮培養(yǎng)的菌種,適溫培養(yǎng)至孢子長成。
 
  以上就是小編為大家介紹的菌種的培養(yǎng)條件以及保存方法介紹,大家可以去了解一下,如果有問題的話可以聯(lián)系我們公司。

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