【細(xì)胞培養(yǎng)的注意事項(xiàng)】

1、原代動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)：

（1）實(shí)驗(yàn)材料要新鮮，從活體分離材料后要低溫保存，并盡快進(jìn)行細(xì)胞分離實(shí)驗(yàn)。

（2）無菌操作。操作時(shí)用的培養(yǎng)液，可加平時(shí)細(xì)胞培養(yǎng)液5倍含量的青鏈霉素。

（3）用酶法分離細(xì)胞時(shí)，注意酶液的濃度和控制消化時(shí)間。

貼塊法分離細(xì)胞時(shí)，注意動(dòng)作要輕柔，不要傷到細(xì)胞組織，組織塊邊緣盡量平整有利于細(xì)胞游離。

（4）培養(yǎng)液的選擇。不同的細(xì)胞有對培養(yǎng)液中營養(yǎng)的要求不同，根據(jù)所分離細(xì)胞的特性選擇。

2、傳代細(xì)胞培養(yǎng)：

（1）無菌操作

（2）控制消化時(shí)間

（3）及時(shí)關(guān)注細(xì)胞生長狀態(tài)

【細(xì)胞培養(yǎng)的類型】

體外細(xì)胞培養(yǎng)根據(jù)細(xì)胞的生長是否需要貼附在支持物上，可將其分為貼附型和懸浮型兩大類。

1、貼附型。

貼附型細(xì)胞又稱錨定依賴型細(xì)胞，只能附著于底物（支持物）表面生長，當(dāng)細(xì)胞貼附在支持物上之后，易失去它們在體內(nèi)時(shí)原有的特征，細(xì)胞分化現(xiàn)象常變得不顯著。在光學(xué)顯微鏡下可將體外培養(yǎng)的貼附型細(xì)胞從形態(tài)上分為成纖維型細(xì)胞、上皮型細(xì)胞、游走型細(xì)胞、多形性細(xì)胞。

2、懸浮型。

有的細(xì)胞在培養(yǎng)時(shí)不貼在支持物上，而是懸浮在液體中，呈懸浮狀態(tài)生長，如某些腫瘤細(xì)胞和血液白細(xì)胞等。細(xì)胞懸浮生長時(shí)胞體呈圓球型。