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普通瓊脂培養(yǎng)基的配制步驟,瓊脂培養(yǎng)基怎么制作的?

作者:樂診生物技術發(fā)布時間:2021-08-02 14:16:01瀏覽量:0

培養(yǎng)基的配置:

1.配料

配方換算→在容器中加入少量水(蒸餾水,自然水)→按照配方稱取各種藥品(依次加入)→加足所需水量(一藥一勺,取藥后立即蓋上瓶蓋)。

2.溶解

淀粉溶解:少量冷水調成糊狀

加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養(yǎng)基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95-97℃ ,且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。

3.調PH

用1N的鹽酸或1N的 NaOH把培養(yǎng)基調節(jié)到所要求的值。

4.過濾

濾紙或棉花進行過濾。(有時可以省去)[3]

5.分裝

一般培養(yǎng)基放在三角瓶或試管中滅菌使用。

(1)三角瓶

若作靜置培養(yǎng),則100ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,最多不能超過150ml培養(yǎng)基/250ml的

三角瓶,否則滅菌時培養(yǎng)基沸騰容易污染棉塞,造成染菌;若作搖瓶培養(yǎng),則15-20ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,保證通氣良好。

(2)試管分裝

液體培養(yǎng)基一般裝4-5ml,約試管的1/4高度;

固體斜面培養(yǎng)基一般裝3-4ml,約試管的1/5高度。

6.包扎

分裝好后,塞上棉塞,在用牛皮紙將棉塞包裹好,防止滅菌時水份進入把棉塞弄濕。

7.滅菌

按配方上要求的溫度、壓力進行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高,營養(yǎng)成分會被破壞,培養(yǎng)

基中的糖、氨基酸會使培養(yǎng)基的顏色變深。

8.擺斜面

滅菌后需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放,使其凝固成為一個斜面,約占試管長度的1/2。

9.貯存

培養(yǎng)基在30℃下放置一天,無污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用

為了使食用菌能正常生長發(fā)育,培養(yǎng)基除了必須有足夠的碳、氮營養(yǎng)外,還應注意碳與氮的比例(碳氮比,C/N)。這樣既能保證營養(yǎng)生長階段對營養(yǎng)的需要,也能保證生殖生長的順利進行。例如,巴西蘑菇培養(yǎng)料適宜的碳氮比(C/N)為28~30∶1,含氮量1.4%~1.6%,投料量30~35千克/米2。我們可以按照培養(yǎng)料主要物料的碳氮比(詳見附錄4)設計配方。

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