微生物培養(yǎng)基制備要求

　　培養(yǎng)基配制的質(zhì)量將直接影響微生物的生長。由于各種微生物的營養(yǎng)要求和培養(yǎng)目的不同，對各種培養(yǎng)基的制備要求如下:

　　1. 根據(jù)培養(yǎng)基配方的組成稱量，溶于蒸餾水中。使用前，應(yīng)檢查所使用試劑和藥品的質(zhì)量。

　　2. PH值測量和調(diào)整:PH值測量應(yīng)在培養(yǎng)基冷至室溫時(shí)進(jìn)行。由于熱、冷條件下pH值存在一定差異，測量完成后，按計(jì)算量加堿或酸并混合均勻，然后再次測試。培養(yǎng)基的pH值必須準(zhǔn)確，否則可能影響微生物的生長或影響結(jié)果的觀察。但需要注意的是，高壓滅菌會影響某些培養(yǎng)基pH值的降低或升高，因此不建議滅菌壓力過高或次數(shù)過多，以免影響培養(yǎng)基質(zhì)量。指示劑、脫氧膽酸鈉、瓊脂等一般在調(diào)整pH后加入。

　　3.培養(yǎng)基應(yīng)保持清潔，以便觀察細(xì)菌生長情況。培養(yǎng)基加熱煮沸后，可用脫脂棉或絨布過濾去除沉淀物。如有必要，可用蛋清澄清。使用的瓊脂條在使用前應(yīng)事先清洗和干燥，以避免因瓊脂中的雜質(zhì)而影響透明度。

　　4. 鐵和銅等容器不能用來盛放培養(yǎng)基。最好使用水洗過的中性硬玻璃容器。

　　5. 培養(yǎng)基的殺菌不僅要達(dá)到完全殺菌的目的，還要注意不要因?yàn)榧訜岫档推錉I養(yǎng)價(jià)值。一般121℃15分鐘就足夠了。如果培養(yǎng)基中含有不耐高溫的物質(zhì)，如糖、血清、明膠等，應(yīng)采用低溫殺菌或間歇法殺菌。一些不能加熱的試劑，如溴酸鉀、蛋黃、TTC、抗生素等，應(yīng)在基礎(chǔ)瓊脂高壓殺菌后冷卻至50℃左右再加入。

　　6. 每批培養(yǎng)基配制完成后，應(yīng)進(jìn)行無菌生長試驗(yàn)和被測菌株的生長試驗(yàn)。如果是生化培養(yǎng)基，用標(biāo)準(zhǔn)菌株接種，觀察生化反應(yīng)結(jié)果。反應(yīng)應(yīng)該正常。培養(yǎng)基不能存放太久。必要時(shí)可存放在4℃冰箱中。

　　7. 目前干培養(yǎng)基種類繁多，每批都需要一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行生長測試或生化反應(yīng)觀察。各種培養(yǎng)基只有在相應(yīng)的應(yīng)變生長試驗(yàn)良好后才能使用。新購買或儲存的干培養(yǎng)基在制備時(shí)還應(yīng)測試pH值，并應(yīng)按產(chǎn)品說明書中的劑量和方法使用。

　　8. 對配制的每一批培養(yǎng)基都應(yīng)做好記錄，包括所用化學(xué)試劑、滅菌條件、菌株生長試驗(yàn)結(jié)果、生產(chǎn)人員等，以備備查。