在現(xiàn)在的生化行業(yè)中，對(duì)于定量菌株的使用是非常廣泛的，我們?cè)谑褂盟臅r(shí)候不僅要保證使用正確的使用方法，還要保證進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)要注意很多事情，比如樣品稀釋、試劑盒平衡、樣品和試劑的混勻、加樣、洗板、以及操作要點(diǎn)等等幾個(gè)方面。在文章中，小編就針對(duì)定量菌株的使用方法，以及使用它進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)的注意事項(xiàng)這兩方面來(lái)給大家做一個(gè)詳細(xì)的介紹。
定量菌株的使用方法：
1、用移液器或者注射器取定量定量菌株的稀釋液到裝凍干球的瓶子中。
2、請(qǐng)將盛有定量菌株的瓶子放在漩渦混合器上混勻2分鐘，使其溶解充分。
3、用移液器或者注冊(cè)器吸取定量菌株的定量菌液，一般為0.1ml左右。
4、將0.1ml定量菌株的菌液均勻接種到待檢培養(yǎng)基。
5、用玻璃棒將定量菌株的菌液均勻涂布在待檢培養(yǎng)基表面。
6、晾干平皿，在恒溫環(huán)境中培養(yǎng)，一定時(shí)間后取出觀察計(jì)數(shù)。
使用定量菌株進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)的注意事項(xiàng)：
1、樣品稀釋
一般定量菌株的樣品稀釋倍數(shù)均通過(guò)大量試驗(yàn)確定，以保證試驗(yàn)的靈敏度和特異性。酶聯(lián)免疫反應(yīng)是一種敏感性很高的反應(yīng)，如果血清不稀釋，不可避免會(huì)產(chǎn)生很強(qiáng)的非特異性反應(yīng)，出現(xiàn)假陽(yáng)性。
2、試劑盒平衡
定量菌株應(yīng)在試驗(yàn)前平衡至約25℃的室溫，一般需在室溫放置20-30分鐘以上。平衡時(shí)間太短會(huì)造成試劑混勻不夠，樣品孵育時(shí)間相對(duì)縮短，反應(yīng)不夠充分。冬季室溫低，可將試劑盒置37℃溫箱20分鐘。
3、樣品和試劑的混勻
在對(duì)定量菌株稀釋前、后的樣品必須充分混勻，所有試劑在加樣前也須搖勻，以保證試驗(yàn)的均一性。
4、加樣
加樣是一項(xiàng)很重要的步驟。加樣不可太快，要避免加在孔壁上部，不可濺出和產(chǎn)生氣泡。加樣太快，無(wú)法保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū)，易導(dǎo)致非特異吸附。
5、洗板
固相免疫測(cè)定技術(shù)是一種非均相免疫測(cè)定技術(shù)，需以洗滌操作將特異結(jié)合于固相的抗原或抗體與反應(yīng)溫育過(guò)程中吸附的非特異成份分離開(kāi)來(lái)，以保證定量菌株測(cè)定的特異性。
6、操作要點(diǎn)
定量菌株洗液盡量不要溢出孔外；加洗液后要靜置1分鐘，甩去板孔中洗液后，一定要大力拍干；及時(shí)更換吸水紙，尤其是拍過(guò)酶標(biāo)記物的吸水紙一定要棄去，否則可能影響試驗(yàn)結(jié)果。
綜上所述，在看完文章之后，相信大家對(duì)于定量菌株的相關(guān)知識(shí)一定更了解了，如果大家想要了解更多的話，可以隨時(shí)來(lái)咨詢我們！
