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培養(yǎng)基制備的注意事項,配制培養(yǎng)基過程中應該注意什么問題?

作者:樂診生物技術發(fā)布時間:2021-09-17 14:53:59瀏覽量:0

1、為確認工作細胞庫是否受到污染,病毒種子的工作種子批次是否受到污染,培養(yǎng)基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否受到污染,可通過細菌、真菌、支原體無菌試驗確認和消除。同時,還應驗證無菌試驗介質的靈敏度。

實際生產中,可以從配制好的培養(yǎng)液中取少量加入營養(yǎng)瓊脂于恒溫培養(yǎng)箱內培養(yǎng),48小時即可觀察有無污染。

2、高壓滅菌設備和過濾滅菌設備應進行驗證,以確保滅菌滅菌效果;高壓滅菌設備調試前后每6個月進行一次驗證,每滅菌前后(滅菌后至少一次)進行驗證。

3、有毒區(qū)域應嚴格與無毒區(qū)隔離,并應設置獨立的空氣凈化系統和培養(yǎng)箱。毒性區(qū)應在無毒區(qū)保持相對負壓,防止病毒污染培養(yǎng)細胞(特別是細胞庫)。

4、在基本培養(yǎng)基中加入抗生素,野生型菌株被殺死,營養(yǎng)缺陷型不能在基本培養(yǎng)基中生長而被保留下來。

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