將加好棉塞的試管4～5支捆扎好，用牛皮紙（或兩層報紙）包住管（瓶）口，然后滅菌，做平板培養(yǎng)基要用的培養(yǎng)皿等，要事先洗凈、烘干、包裝好，進(jìn)行干熱滅菌。

試管培養(yǎng)基滅菌后，要趁熱斜放。先在桌上放一長木板條，然后逐個擺放，使培養(yǎng)基斜面長度為試管長度的2/5至3/5，冷凝后即成斜面培養(yǎng)基。三角瓶中的培養(yǎng)基可趁熱倒入已滅菌的培養(yǎng)皿中，制作平板培養(yǎng)基。方法是：將培養(yǎng)基冷卻至45～50℃（低于45℃易凝固，應(yīng)在水浴鍋中加熱融化），左手拿培養(yǎng)皿，右手拿三角瓶底部，用左手小指和手掌將三角瓶口的棉塞拔下，并握在手中，灼燒瓶口片刻，在酒精火焰旁將培養(yǎng)皿打開一小縫，使瓶口正好伸入，傾入培養(yǎng)基約15mL，平置、凝固即成。注意：操作者事先必須洗凈手，并用70%酒精消毒。