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瓊脂糖凝膠電泳緩沖液的作用,在DNA瓊脂糖膠電泳實(shí)驗(yàn)中

作者:樂診生物技術(shù)發(fā)布時(shí)間:2021-08-10 11:34:53瀏覽量:0

(1)緩沖液在電泳過程中的一個(gè)作用是維持合適的pH。電泳時(shí)正極與負(fù)極都會(huì)發(fā)生電解反應(yīng),正極發(fā)生的是氧化反應(yīng)(4OH--4e->2H2O+O2),負(fù)極發(fā)生的是還原反應(yīng)(4H++4e->2H2),長時(shí)間的電泳將使正極變酸,負(fù)極變堿。一個(gè)好的緩沖系統(tǒng)應(yīng)有較強(qiáng)的緩沖能力,使溶液兩極的pH保持基本不變。

(2)電泳緩沖液的另一個(gè)作用是使溶液具有一定的導(dǎo)電性,以利于DNA分子的遷移,例如,一般電泳緩沖液中應(yīng)含有0.01-0.04mol/L的Na+離子,Na+離子的濃度太低時(shí)電泳速度變慢;太高時(shí)就會(huì)造成過大的電流使膠發(fā)熱甚至熔化。

(3)電泳緩沖液還有一個(gè)組分是EDTA,加入濃度為1-2mmol/L,目的是螯合Mg2+

等離子,防止電泳時(shí)激活

DNA酶,此外還可防止Mg2+離子與核酸生成沉淀。

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