工業(yè)微生物菌種在使用之前,往往需要經(jīng)歷選育這個(gè)步驟,目的是為了能夠挑選到更適合我們使用的微生物菌種,那么選育的步驟是什么呢?分別是采樣、增殖培養(yǎng)、純種分離、以及生產(chǎn)性能的測(cè)定等等幾個(gè)步驟。并且在使用的時(shí)候,還需要對(duì)所選用的菌種進(jìn)行分離和純化。在文章中,小編就圍繞著工業(yè)微生物菌種選育的步驟,以及它的分離和純化這兩方面來(lái)給大家做一個(gè)詳細(xì)的介紹。

工業(yè)微生物菌種選育的步驟:
1、采樣
采樣地點(diǎn)的確定要根據(jù)篩選的目的、微生物的分布概況及菌種的主要特征與外界環(huán)境關(guān)系等,進(jìn)行綜合、具體地分析來(lái)決定。如果預(yù)先不了解某種生產(chǎn)菌的具體來(lái)源,一般可從土壤中分離。
采樣的方法多是在選好地點(diǎn)后,用小鏟去除表土,取離地面5-15厘米處的土壤幾十克,盛入預(yù)先消毒好的牛皮紙袋或塑料袋中,扎好,記錄采樣時(shí)間、地點(diǎn)、環(huán)境情況等,以備考查。
2、增殖培養(yǎng)
收集到的樣品,如含目標(biāo)工業(yè)微生物菌種較多,可直接進(jìn)行分離。如果樣品含目標(biāo)菌種很少,就要設(shè)法增加該菌的數(shù)量,進(jìn)行增殖培養(yǎng)。所謂增殖培養(yǎng)就是給混合菌群提供一些有利于所需菌株生長(zhǎng)或不利于其它菌型生長(zhǎng)的條件,以促使目標(biāo)菌株大量繁殖,從而有利于分離它們。
3、純種分離
通過(guò)增殖培養(yǎng)還不能得到微生物菌種的純種,因?yàn)樯a(chǎn)菌在自然條件下通常是與各種菌混雜在一起的,所以有必要進(jìn)行分離純化,才能獲得純種。純種分離方法常選用單菌落分離法。把菌種制備成單孢子或單細(xì)胞懸浮液,經(jīng)過(guò)適當(dāng)?shù)南♂尯?,在瓊脂平板上進(jìn)行劃線分離。
4、生產(chǎn)性能的測(cè)定
由于純種分離后,得到的工業(yè)微生物菌種數(shù)量非常大,如果對(duì)每一菌株都作全面或精確的性能測(cè)定,工作量十分巨大,而且是不必要的。一般采用兩步法,即初篩和復(fù)篩,經(jīng)過(guò)多次重復(fù)篩選,直到獲得1-3株較好的菌株,供發(fā)酵條件的摸索和生產(chǎn)試驗(yàn),進(jìn)而作為育種的出發(fā)菌株。

微生物菌種分離和純化的方法:
1、傾注平板法
首先把微生物菌種的懸液通過(guò)稀釋,取一定量的稀釋液與熔化好的保持在40-50℃左右的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基充分混合,然后把這混合液傾注到無(wú)菌的培養(yǎng)皿中,待凝固之后,把這平板倒置在恒箱中培養(yǎng)。單一細(xì)胞經(jīng)過(guò)多次增殖后形成一個(gè)菌落,取單個(gè)菌落制成懸液,重復(fù)上述步驟數(shù)次,便可得到純培養(yǎng)物。
2、涂布平板法
首先把微生物菌種的懸液通過(guò)適當(dāng)?shù)南♂?,取一定量的稀釋液放在無(wú)菌的已經(jīng)凝固的營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上,然后用無(wú)菌的玻璃刮刀把稀釋液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面上,經(jīng)恒溫培養(yǎng)便可以得到單個(gè)菌落。
3、平板劃線法
平板劃線法非常簡(jiǎn)單的分離微生物菌種的方法,用無(wú)菌的接種環(huán)取培養(yǎng)物少許在平板上進(jìn)行劃線。劃線的方法很多,常見(jiàn)的比較容易出現(xiàn)單個(gè)菌落的劃線方法有斜線法、曲線法、方格法、放射法、四格法等。
當(dāng)接種環(huán)在培養(yǎng)基表面上往后移動(dòng)時(shí),接種環(huán)上的菌液逐漸稀釋,然后在所劃的線上分散著單個(gè)細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng),每一個(gè)細(xì)胞長(zhǎng)成一個(gè)菌落。

綜上所述,在看完文章之后,大家對(duì)于微生物菌種的相關(guān)知識(shí)應(yīng)該都有了一個(gè)了解了,如果大家還有什么疑惑的話,可以隨時(shí)來(lái)咨詢我們!