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金黃色葡萄球菌檢驗
1主題內(nèi)容與適用范圍
本文規(guī)定了食品中金黃色葡萄球菌的檢驗方法。
本文適用于航空食品的檢驗。
2設(shè)備和材料
吸管（1ml、10ml）、恒溫培養(yǎng)箱（36±1℃）、冰箱、均質(zhì)器、振蕩器、平皿、稀釋瓶、天平、顯微鏡、接種棒等
3培養(yǎng)基和試劑
普通肉湯培養(yǎng)基、胰蛋白胨大豆肉湯、Baird－Prker瓊脂平板、緩沖蛋白胨水（BP）、凝固酶試驗凍干血漿
4檢驗程序（非選擇性增菌法）
金黃色葡萄球菌檢驗程序如下：
檢樣25g+225mlBP胨水
10ml勻液+10ml雙料胰胨肉湯
上述混合液+20ml20％NaCl單料胰胨肉湯
36±1℃2h
B-P平板
36±1℃24h
36±1℃48h
挑可疑菌落，移種到肉湯培養(yǎng)基
36±1℃24h
觀察溶血
涂片染色
凝固酶試驗
報告
5操作步驟
5.1稱取25g固體樣品；吸取25mL液體樣品，加入225mLBP胨水，固體樣品研磨或置均質(zhì)器中制成混懸液。
5.2吸取10mL上述混懸液，接種于10mL雙料胰蛋白胨大豆肉湯中，置36±1℃培養(yǎng)2h。
5.3再加入20ml含20％NaCl的單料胰蛋白胨大豆肉湯，置36±1℃培養(yǎng)24±2h。
5.4劃線轉(zhuǎn)種2個表面干燥的Baird－Parker瓊脂平板上，36±1℃培養(yǎng)46±2h。
5.5挑取可疑菌落移種到肉湯培養(yǎng)基中，置36±1℃溫箱培養(yǎng)24h。
5.6取肉湯培養(yǎng)物0.3ml同0.5ml凝固酶試驗凍干血漿于8mm*100mm試管內(nèi)充分混合，置36±1℃培養(yǎng)，定時觀察是否有凝塊形成，至少觀察6h，以內(nèi)容物完全凝固，使試管倒置或傾斜時不流動為陽性。試驗中需同時做已知陽性和陰性對照。對可疑結(jié)果，應(yīng)進行革蘭氏染色、鏡檢和其他輔助試驗。
5.7本菌為革蘭氏陽性球菌，排列是葡萄球狀，無芽胞，無莢膜，致病性葡萄球菌菌體較小，直徑約為0.5～1μm。在Baird－Parker平板上為圓形、光滑凸起、濕潤、直徑為2～3mm，顏色呈灰色到黑色，邊緣為淡色，周圍為一混濁帶，在其外層有一透明圈。用接種針接觸菌落似有奶油樹膠的硬度，偶然會遇到非脂肪溶解的類似菌落；但無混濁帶及透明圈。
5.8報告結(jié)果
如發(fā)現(xiàn)有凝固酶試驗陽性的菌落，即報告1g(ml)食品中有金黃色葡萄球菌存在，否則為陰性。
注：本文參照SN0172-92《出口食品中金黃色葡萄球菌檢驗方法》
