一、目的要求
通過對分離真菌用的馬丁氏（Martin）培養(yǎng)基配制，掌握對選擇培養(yǎng)基的配制方法，并明確選擇的原理。
二、基本原理
馬丁氏培養(yǎng)基是一種用來分離真菌的選擇性培養(yǎng)基。此培養(yǎng)基是由葡萄糖、蛋白胨、KH2PO4、MgSO4•7H2O、孟加拉紅（玫瑰紅，Rose Bengal）和鏈霉素等組成。其中葡萄糖主要作為碳源，蛋白胨主要作為氮源，KH2PO4和MgSO4•7H2O作為無機鹽，為微生物提供鉀、磷和鎂離子。而孟加拉紅和鏈霉素主要是細菌和放線菌的抑制劑，對真菌無抑制作用，因而真菌在這種培養(yǎng)基上可以得到優(yōu)勢生長，從而達到分離真菌的目的。
馬丁氏培養(yǎng)基配方如下：
KH2PO4 1g
MgSO4•7H2O 0．5g
蛋白胨5g
葡萄糖10g
瓊脂15—20g
水1000ml
pH自然
此培養(yǎng)液1000ml加1%孟加拉紅水溶液3．3ml。臨用時每100ml培養(yǎng)基中加1%鏈霉素液0．3ml。
三、器材
KH2PO4，MgSO4•7H2O，蛋白胨，葡萄糖，瓊脂，孟加拉紅，鏈霉素；
試管，三角燒瓶，量筒，玻棒，培養(yǎng)基分裝器，扭力天平，牛角匙，高壓蒸汽滅菌鍋等。
四、操作步驟
1．稱量和溶化
按培養(yǎng)基配方，準確稱取各成分，并將各成分依次溶化在少于所需要的水量中。待各成分完全溶化后，補足水分到所需體積。再將孟加拉紅配成1%的溶液，在1000ml培養(yǎng)液中加入1%的孟加拉紅溶液3．3ml，混勻后，加入瓊脂加熱溶化（方法同實驗十九）。
2．分裝、加塞、包扎、滅菌，無菌檢查與實驗十九相同。
3．鏈霉素的加入
由于鏈霉素受熱容易分解，所以臨用時，將培養(yǎng)基溶化后待溫度降至45℃左右時才能加入?？上葘㈡溍顾嘏涑?%的溶液，在100ml培養(yǎng)基中加1%鏈霉素液0．3ml，使每毫升培養(yǎng)基中含鏈霉素30μg。
五、實驗報告
思考題
?。?）什么是選擇培養(yǎng)基？它在微生物學工作中有何重要性？
（2）培養(yǎng)細菌、放線菌、酵母菌、霉菌的最適pH值各為多少？
